上海埃泽思生物科技有限公司

Serum-Free细胞冻存液

产品基本信息

产品简介

Serum-Free细胞冻存液是埃泽思生物（Applied Cell^®）自主开发的一款无血清、无需程序降温的细胞冻存液，适用于多种哺乳动物细胞和间充质干细胞的冻存。该款冻存液内毒素水平远低于药典规定标准，适用于生产型细胞冻存；同时该款冻存液所有成分均为原料药级别，生产过程遵循ISO9001体系,严格执行cGMP操作标准，符合细胞治疗标准。

如需冻存胚胎干细胞/诱导多能干细胞（ES/iPS）参考使用Serum-Free干细胞冻存液（AC-1001012）。

产品特性

l 无动物源成分，无各类病毒、霉菌和支原体等污染的可能性

l 热源水平低于药典标准1/10，减少外源内毒素干扰

l 无血清成分，所有成分均为原料药级别，极大降低批次间差异

l 冻存细胞复苏率高达90%

l 即用型产品，无需程序降温,冻存于-80℃冰箱或液氮中长期保存

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操作方法

选择对数生长期的细胞冻存，有助于提高细胞复苏存活率。

1.1按照常用方法悬浮细胞或贴壁细胞收集于离心管中。

1.2 1000rpm-1500rpm，5min离心，弃上清液。

1.3加入适量的Serum-Free细胞冻存液于离心管中，推荐细胞冻存浓度为 1×10⁶ - 1×10⁷ cells/ml。缓慢混合均匀，制成细胞悬液。

1.4将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

1.5直接将冻存细胞放入-80℃冰箱，24h后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。

细胞复苏操作方法

2.1从液氮罐取出冻存细胞，立即放入37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中，快速融化。

2.2准备离心管，加入2倍冻存细胞体积的细胞培养基，待冻存管中细胞完全融化后，将冻存细胞悬液缓慢加入离心管中。

2.3 1200-1500rpm 5min离心，弃上清。

2.4加入适量新鲜培养基，使用移液管缓慢悬浮细胞，并将细胞转染细胞培养皿/瓶中，显微镜下观察细胞状态，放入细胞培养箱中培养。

2.5 24h后观察细胞状态，并更换新鲜细胞培养液。

细胞状态图

杂交瘤细胞复苏                           SP20细胞复苏                            239T细胞复苏

24h细胞形态图                             24h细胞形态图                          24h细胞形态图

24h                                             48h

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