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血细胞分析仪中用到的检测技术
发布时间:2013-08-19        浏览次数:217        返回列表
 
为了保证血细胞计数的精密度和准确性,除核心的检测系统外,在血细胞分析仪上应用了多种分析技术及计算机技术,下面介绍几项血细胞分析仪的常用技术。
(一)鞘流技术
为了使细胞在检侧时呈单排通过检测系统,避免计数中血细胞从小孔边缘处注人及湍流,发明了鞘流技术。具体方法为:用一毛细管对准小孔管,细胞单纯悬液从毛细管喷嘴中喷出,同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区,保证细胞悬液在中间形成一单个排列的细胞液,四周被鞘液围绕。
(二)浮动界标技术
红细胞和血小板共用一个小孔管进行检测,在测定正常标本时,红细胞和血小板体积相差较大,可以得到正确的分析结果。但在某些病理情况下可能有大血小板超过了规定的35n界限,则必然将大血小板漏计,使血小板计数结果偏低;反之如果红细胞体积偏小(如缺铁性贫血、地中海性贫血),则可能将小红细胞误计为血小板。CPU对血小板和红细胞体积分布图进行分析,将血小板计数的上限闭值判定线放在红细胞和血小板体积分布图交叉部分的最低处计数。sloidwr
(三)拟合曲线技术
血小板计数时,为了排除Zn以下电子背景与杂质干扰和20n以上小红细胞和其他小细胞对血小板计数的干扰,库尔特公司设计直接计数2一20fl范围内的血小板,然后再根据正常人血小板体积分布符合对数正态分布的理论,通过O一70fl的电子拟合曲线将没有被直接计入的血小板间接计人总数内,这样使血小板计数既少受干扰,又可能将标本中的大血小板或小血小板通过拟合计数在内。
(四)扫流技术
由于血小板和红细胞同在一个计数池内计数,红细胞在经过小孔后若发生回流,只要稍微触及小孔感应区,电极就叮能感应到相当于血小板大小的小脉冲,使血小板计数假性升高。扫流技术是在小孔的后侧安装一个稳定的液流装置,这样可以使计数后的红细胞立即被冲走,消除可能的回流对血小板计数的影响。
(五)防反流装置
为了防止被计数的红细胞又返回到感应区,触及敏感区,在小孔的内侧安装一块带孔的挡板,板上小孔的直径比红细胞计数孔略大,正好位于计数孔的后方。当进行细胞计数时,由于负压的作用细胞快速通过小孔感应区并穿过挡板小孔,即使挡板外侧产生涡流,红细胞也会被阻挡在感应区之外,不影响血小板计数。
(六)血小板延时计数
细胞计数时,当标本的血小板计数结果明显降低,如<67x10^9/L,且红细胞计数>1.0/ 10^12/L时,血细胞分析仪会自动延长计数时间,保证达到一定的血小板统计量,提高计数准确度,减少统计学误差。
(七)三次计数
为了得到准确可靠的计数结果,血细胞分析仪对主要参数如WBC、RBC、PLT和MPV四项均做3次重复计数。若3次计数结果的离散度在一定范围内,则取3次计数的平均值报告结果;若有其中一次计数与另两次相差偏大,则该次计数被赋予警报,只报告另两次计数的平均值;若3次计数结果均相差大,则无结果(包括数据及直方图)报出。
(八)重.校正
细胞计数时,理想状态是让细胞一个个通过小孔。但是红、白细胞的直径平均为7一10 um,大者也只有20um左右,而小孔直径有100urn。实际计数时会有两个或两个以上的细胞重叠在一起同时经过计数孔,这种情况产生的脉冲幅值比单个细胞要大,但只能产生一个脉冲,导致细胞数假性降低而体积值假性升高,这种现象称为重合损失。出现重叠的概率与细胞浓度、孔径和液体流速有关,为了弥补这种损失,库尔特公司通过专利的逻辑电流校正这类重叠,以保证计数的准确性。
(九)脉冲编辑
由于计数孔直径明显大于所检测细胞的体积,计数过程中当细胞通过小孔的电阻感应区时,不会所有的细胞都在中心区通过,由于路径不同,产生的脉冲会有所变化,对体积测量构成影响。采用脉冲编辑技术来修正这种影响,以得到正确的细胞计数及体积测定结果。
(十)高精度分析
为了达到细胞体积分析的高分辨率和高精度,绝大多数血细胞分析仪设计在35~45Ofl范围内,分256个通道分析白细胞,有的设计了512个通道;在36~3600范围内,分256个通道分析红细胞;在2~20fl范围内,分64个通道分析血小板,使细胞体积分析达到最佳效果,提供出准确的细胞体积分布直方图。
(十一)燃烧电路
该电路能灼烧小孔,自动清洁囤积在计数小孔的蛋白质,防止计数小孔堵塞。
(十二)延长计数
当所计数的细胞少于界定的数量时,计数器会自动延长计数时间,即重复计数,以保证相当的统计数,减少统计学误差,确保报告结果的准确度和精密度。
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