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人间充质干细胞成脂分化试剂盒AC-1001029

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品牌: 上海埃泽思
产品名称: 人间充质干细胞成脂分化试剂盒
规 格: 1kit
运输保存条件: 基础培养基2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后2-8℃
单价: 1318.00元/套
起订: 1 套
供货总量: 1000 套
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
所在地: 上海
有效期至: 长期有效
最后更新: 2023-10-07 14:02
浏览次数: 532
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公司基本资料信息
详细说明


人间质干细胞成脂分化试剂盒

产品基本信息

产品名称

Applied Cell® 人间质干细胞成脂分化试剂盒

货    号

AC-1001029

规    格

1kit

保存条件

基础培养基2-8,添加剂-20--80保存;

混合后2-8℃保存,2-3周内使用完毕

使用范围

人间质干细胞诱导分化成脂

保质期

1年

产品简介

人间充质干细胞分化试剂盒是埃泽思生物Applied Cell®自主研发的一款用于人间充质干细胞分化成的试剂盒可用于骨髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的成脂分化。本产品仅限于科学研究,不能用于临床诊断、治疗,以及其他用途。

试剂

规格

数量

运输

人间充质干细胞成脂分化基础培养基

90mL

1

冰袋

人间质干细胞成脂分化添加剂

10mL

1瓶

干冰

产品内容

产品特性

诱导分化程序简单便捷。

诱导成脂细胞效率高。

操作方法

1. 相关材料

Xeno-Free间充质干细胞培养基(Applied Cell®:AC-1001003

人间充质干细胞成脂分化试剂盒Applied Cell®:AC-1001029

成脂检测染液(Applied Cell®:AC-1001022

Xeno-Free细胞消化液(Applied Cell®:AC-1001024/1001025

磷酸盐缓冲液(1×PBS) Applied Cell®: Cat.AC-1001037 

2.实验准备

人间充质干细胞成脂分化培养基的配制

2.1在2-8℃解冻人间充质干细胞成脂分化添加剂,轻晃摇匀;

2.2 随后将添加剂加入到人间充质干细胞成脂分化基础培养基中(10ml 添加剂90mL基础培养基彻底混合)混匀即为人间充质干细胞成脂分化培养基人间充质干细胞成脂分化培养基可在2-8℃稳定储2周。

注意:人间充质干细胞脂肪维持添加剂只能在2-8℃解冻,待添加剂加入到培养基以后,请用培养基润洗添加剂瓶1-2次,因添加剂量较少可防止添加剂粘附在试管壁上造成损失。

3. 实验操作

诱导成脂(以6孔板为例)

3.1 传代或复苏冻存的质干细胞接种到6孔板上,密度为2×105 -3×105 cells/cm2或2×105 -3×105 cells/孔,置于37℃,5% CO2培养箱中培养

3.2 人间充质干细胞融合度达到80-90%时,开始诱导脂肪前体细胞分化。吸掉 Xeno-Free人间充质干细胞培养基每孔1ml预热PBS清洗一次吸掉PBS,加入2 ml人间充质干细胞成脂分化培养基,以此记为第0天;

注意:人间充质干细胞成脂分化培养基使用前需预热至37℃。

3.3 1-2天更人间充质干细胞成脂分化培养基

3.4 第5-6天可以看到少量脂滴;

3.5 第9-14天待脂肪滴颗粒成熟即可进行拍照,染色。(根据情况诱导时间可适当延长)

注意1.培养基每1-2天换液。由于随着脂肪细胞的成熟,pH的降低会观察到培养基变黄。pH从7降到6.5,细胞增殖会变慢。pH在6.5到6时,细胞活力会降低。所以诱导后期,需要每天换液

2.换液时尽量不使培养基变干,培养基变干会降低细胞层对培养皿表面的粘附。

3.细胞分化效果和供体有关。供体的年龄是一个因素。有研究发现与年长者相比,年轻供体来源的细胞的分化能力更强。

                                  

间充质干细胞在成脂分化1天(A)、5天(B)、13天(C)时的细胞照片,可以观察到成簇的脂滴(200×)


4. 成脂检测染液染色

4.1每6ml成脂染液加入4ml蒸馏水制成染色工作液,混匀室温放置5-10分钟。加入蒸馏水后,染液会有片状结晶析出,可用直接使用或滤网过滤除掉结晶。

4.2脂肪诱导分化结束后,吸掉原有培养基,用1×PBS冲洗1-2次。每孔加入适量细胞固定液, 固定20 min。

4.3掉细胞固定液,用1×PBS冲洗2次。加入适量染色工作液,使染液完全覆盖脂肪滴,室温染色15min。

4.4掉染色工作液,用1×PBS冲洗2-3次。

4.5将培养板置于显微镜下观察脂滴染色效果拍照。

注意:染色后显微镜观察,及时拍照。如果时间过长,脂肪滴会发生破裂。

 间充质干细胞在成脂后染色前(D)和染色后(E)的照片(400×)




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