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人成纤维细胞无血清培养基 上海埃泽思AC-1001015

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品牌: Applied Cell(上海埃泽思)
产品名称: 人成纤维细胞无血清培养基
货 号: AC-1001015
规 格: 500 mL
单价: 1948.00元/套
起订: 1 套
供货总量: 1000 套
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
所在地: 上海
有效期至: 长期有效
最后更新: 2024-01-02 16:46
浏览次数: 376
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公司基本资料信息
详细说明

人成纤维细胞无血清培养基

产品基本信息

产品名称

Applied Cell®人成纤维细胞无血清培养基

货    号

AC-1001015

规    格

500mL

运输保存条件

基础培养基2-8℃,添加剂-20--80℃

使用范围

人真皮/肺/心脏等多种组织器官来源成纤维细胞培养

保质期

12个月

产品简介

人成纤维细胞无血清培养基埃泽思生物科技有限公司Applied Cell®)自主研发的一款适用于人成纤维细胞培养的无动物源细胞培养产品。本产品应用人真皮、肺、心脏等多种组织器官来源成纤维细胞原代分离、扩增与传代培养,且不含动物血清,内毒素水平低于药典标准(<0.06EU/mL)。本产品生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。

产品特性

无外源动物蛋白成分,大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。

全程无血清生产,极大降低批次间差异。

可用于原代分离。

内毒素<0.06EU/ml,远低于中国药典水平。

组分

规格

数量

运输

人成纤维细胞基础培养基

450mL

1瓶

冰袋

人成纤维细胞添加剂

50mL

1瓶

干冰

产品内容

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操作方法

人成纤维细胞培养基配制

1.1 37℃快速解冻人成纤维细胞培养基添加剂,快速溶解时不易破坏添加剂中营养物质,时间大致为10min。待添加剂融化后摇匀,分装或直接按比例添加到基础培养基中,分装后添加剂立即储存于-20-80℃,避免反复冻融 。

1.2将添加剂以10%比例加入到人成纤维细胞基础培养基混匀,即为人成纤维细胞培养基(AC-1001015混合后培养基可在2-8℃ 稳定储存2-3周,不建议使用已配制超过3周的培养基。

1.3人成纤维细胞培养基可直接应用于人真皮、肺、心脏等多种组织器官来源的成纤维细胞的原代分离、扩增与传代培养。

操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作)

人成纤维细胞复苏(10cm dish)

2.1  从液氮或-80℃冰箱中取出冻存的人成纤维细胞,迅速放入37℃水浴快速融解。

2.2 在生物安全柜或超净台中,将解冻后的细胞悬液缓慢加入5 mL预温的人成纤维细胞培养基(AC-1001015)

2.3 1000rpm 离心3 min,吸掉上清,加入10ml人成纤维细胞培养基重悬细胞。

2.4 将细胞均匀铺到培养皿中,水平十字振动培养皿使细胞均匀分布,5% CO237℃恒温细胞培养箱中培养24小时后观察细胞状态。

2.5 24h后更换新鲜人成纤维细胞培养基继续培养,每2-3天更换培养液。

人成纤维细胞传代培养

1. 在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到90%,即可传代。

2. 在超净台/安全柜中,吸掉原有培养基,加入PBS溶液清洗一次,加入Xeno-Free细胞消化液(AC-1001024/1001025使之完全覆盖皿/瓶底。

3. 室温孵育4-5分钟或37℃孵育2-4分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

4. 加入消化液2倍体积的人成纤维细胞培养基,用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。

5. 将细胞悬液转移到15 mL离心管中,1000 rpm离心3 min

6. 弃上清,加入人成纤维细胞培养基,重悬细胞,计数。1:2-1:4比例传代,或按2-5x104 cells/cm2  传代,均匀铺在培养皿/瓶中,置于37℃5%CO2 培养箱中培养。

注意:人成纤维增殖情况与细胞密度密切相关,所以传代时细胞密度不宜过稀。

人成纤维细胞冻存

1.  细胞达到90%汇合度, 吸掉原有培养基PBS清洗一次。

2. 加入Xeno-Free细胞消化液(AC-1001024/1001025)使之完全覆盖皿/瓶底,室温孵育4-5min或37℃孵育2-4min分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

3. 加入消化液2倍体积的人成纤维细胞培养基,用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。

4.   将细胞悬液转移到15 mL离心管中,1000 rpm离心3 min,吸掉上清。

5. 加入适量Serum-free细胞冻存液(AC-1001006),调整细胞冻存密度在1×106 cells/mL左右,每支冻存管分装1.5-2ml

6. 直接放入-80℃,24h后转入液氮中长期保存。

质量控制

检验项目

Test Catagories

参考数据

Reference Data

结果

The results

外观

Physical APPearance

橙红色液体

Orange-red liquid

符合规定

Conform to the provisions

澄清度

Clarity

澄清

Clear

符合规定

Conform to the provisions

pH值

Ph value

6.9-7.3

符合规定

Conform to the provisions

渗透压

Osmolality

270-340

(mosm/KgH2O)

符合规定

Conform to the provisions

细菌内毒素

Endotoxin

小于0.06 EU/ml

符合规定

Conform to the provisions

无菌

Sterility

无菌

Sterility

符合规定

Conform to the provisions

支原体

Mycoplasma

0.11um过滤,支原体试验为阴性

The mycoplasma test was negative after 0.11um filtration

符合规定

Conform to the provisions

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